เอนไซม์ที่อยู่ในกลุ่มไฮโดรเลส คือ กลุ่มของเอนไซม์ที่สลายสารตั้งต้นต่างๆโดยมีน้ำเป็นซับสเตรตอีกตัวหนึ่งเป็นตัวช่วย ตัวอย่างเอนไซม์ในกลุ่ม ไฮโดรเลส ได้แก่ เอสเทอร์เรส (esterase) เป็นเอนไซม์ที่แยกสลายเอสเทอร์ออกเป็น กรด และ แอลกอฮอล์ด้วยน้ำ ซึ่งอาจเรียกว่ากระบวนการ แยกสลายด้วยน้ำ (hydrolysis)
ตัวอย่างเช่น ไลเปส (lipase : EC 3.1.1.3) แยกไขมันออกเป็น
กลีเซอรอลและกรดไขมัน
อัลคาไลน์ฟอสฟาเทส (alkaline phosphatase ; EC 3.1.3.1) คือ เอนไซม์ที่แยกสลายฟอสเฟตอินทรีย์ออกเป็น
แอลกอฮอล์ และหมู่ฟอสเฟตอนินทรีย์ ในสภาวะที่เป็นด่าง
