การเพิ่มความเข้มข้นของซับสเตรต จะทำให้อัตราเร็วเริ่มต้นเพิ่มขึ้น อย่างรวดเร็วในช่วงที่ความเข้มข้นของซับสเตรตยังน้อยอยู่แต่จะเพิ่มขึ้น
ในอัตราที่ช้าลงในช่วงที่ความเข้มข้นของซับสเตรตสูงมากและในที่สุด
อัตราเร็วเริ่มต้นจะสูงคงที่ไม่แปรผันกับความเข้มข้นของซับสเตรตอีกต่อไป

      เอนไซม์แต่ละตัวจะมีค่า pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด ซึ่งส่วนใหญ่จะอยู่ในช่วงระหว่าง
pH 5 ถึง pH 9 ความสามารถของเอนไซม์ในการจับกับซับสเตรต และ
ในการเร่งปฏิกิริยาอาจขึ้นอยู่กับความสมดุลของประจุของหมู่ต่างๆ ในบริเวณเร่ง
และบริเวณจับของเอนไซม์ รวมทั้งประจุของซับสเตรตเองด้วยที่ pH ต่ำหรือสูง
เกินไปมักทำให้ประจุเปลี่ยนไปจนไม่เหมาะสมที่จะทำปฏิกิริยากัน นอกจากนี้ที่ pH
สูงมากหรือต่ำมากอาจทำให้โครงสร้างของเอนไซม์เสียรูปร่างสามมิติเปลี่ยนไปจนทำงานไม่ได้

      เมื่อเพิ่มอุณหภูมิมักจะทำให้ปฏิกิริยาเคมีทั่วๆไปมีอัตราเร็วสูงขึ้นเพราะจะทำให้
โมเลกุลของซับสเตรตมีพลังงานมากขึ้นและเพิ่มโมเลกุลที่มีพลังงานเพียงพอที่จะ
เข้าสู่สภาพเปลี่ยนแต่สำหรับปฏิกิริยาของเอนไซม์ การเพิ่มอุณหภูมิจะทำให้อัตราเร็ว
ของปฏิกิริยาเพิ่มขึ้นด้วยแต่ที่อุณหภูมิสูงเกินไปอาจทำให้เอนไซม์เสียสภาพธรรมชาติ
อัตราเร็วจะลดลงทันที

      เมื่อปฏิกิริยาเกิดที่ความเข้มข้นอิ่มตัวของซับสเตรตอัตราความเร็วเริ่มต้น
จะเป็นสัดส่วนโดยตรงกับปริมาณเอ็นไซม์ที่ใช้